Лісовий, М. М. та Копій, Л. І. та Клименко, О. М. та Фізик, І. В. та Гончар, В. М. та Копій, С. Л. та Хоєцький, П. Б. та Копій, М. Л. та Агій, В. О. та Гожан, М. Я. (2025) ВПЛИВ РЕЧОВИН-СТЕРИЛЯНТІВ НА ДЕКОНТАМІНАЦІЮ ЕКСПЛАНТІВ PINUS SYLVESTRIS L. В КУЛЬТУРІ IN VITRO. Вісник Національного університету водного господарства та природокористування (2(110)). с. 161-174.

Text Vs2202512.pdf Download(456kB)

Анотація

Проведено аналіз та узагальнення літературних даних, як вітчизняних, так і іноземних вчених, які стосуються досягнень у сфері мікроклонального розмноження в культурі in vitro рослин Pinus sylvestris L., зокрема процесу деконтамінації вихідних експлантів. Виконано дослідження впливу концентрації хімічних агентів-стерилянтів, а також тривалості обробітку (експозиції) ними на стерилізацію вихідних експлантів досліджуваного виду. Детально охарактеризовано використану методику проведення експериментальних досліджень по отриманню асептичної культури експлантів Pinus sylvestris L. для подальшого розмноження їх in vitro. Проведено тестування ступінчастої схеми деконтамінації рослинного матеріалу, яка проходила у два основні етапи: первинна та модифікована стерилізація. Перший етап полягав у обробітку експлантів наступним чином: протічна вода із відповідним детергентом («Твін 80»), пероксид водню (Н2О2) (1; 2; 3% та 3; 5; 10 хвилин), етиловий спирт (С2Н5ОН) (50; 70; 96% та 5; 10; 15 секунд) у наведених концентраціях та експозиціях. Модифікацію первинної схеми деконтамінації експлантів виконували із використанням таких основних хімічних речовин: NaClO (10; 20; 30% та 3; 5; 7 хвилин), AgNO3 (0,1; 0,2; 0,3% та 5; 10; 15 хвилин) та HgCl2 (1; 2; 3% та 5; 10; 15 хвилин). Щоб запобігти розвитку внутрішніх інфекцій, застосовували 0,1% антибіотик «Іманін». Виконано дослідження конкретного окремого впливу основних хімічних агентів- стерилянтів на ефективність стерилізації та життєздатність експлантів Pinus sylvestris L. Експериментально встановлено оптимальну ступінчасту схему деконтамінації експлантів досліджуваного виду, яка забезпечила ефективність стерилізації 94,33±1,41% та життєздатність експлантів 91,7±1,34% і полягала у почерговому обробітку рослинного матеріалу наступним чином: С2Н5ОН (96%; 10 с) + Н2О з детергентом (6 год) + Н2О2 (3%; 10 хвилин) + С2Н5ОН (70%; 10 с) + AgNO3 (0,2%; 5 хвилин) + NaClO (30%; 5 хвилин).

Title in English

INFLUENCE OF STERILANT SUBSTANCES ON THE DECONTAMINATION OF PINUS SYLVESTRIS L. EXPLANTS IN CULTURE IN VITRO

English abstract

An analysis and generalization of a number of literary data, both domestic and foreign scientists, concerning achievements in the field of microclonal propagation in in vitro culture of Pinus sylvestris L. plants, in particular the process of decontamination of initial explants, was carried out. A study was carried out on the influence of the concentration of chemical sterilant agents, as well as the duration of treatment (exposure) with them on the sterilization of initial explants of the studied species. The used methodology for conducting experimental studies on obtaining an aseptic culture of Pinus sylvestris L. explants for their further propagation in vitro was described in detail. A stepwise scheme of decontamination of plant material was tested, which took place in two main stages: primary and modified sterilization. The first stage consisted of treating the explants as follows: running water with an appropriate detergent («Tween 80»), hydrogen peroxide (H2O2) (1; 2; 3% and 3; 5; 10 minutes), ethyl alcohol (C2H5OH) (50; 70; 96% and 5; 10; 15 seconds) in the indicated concentrations and exposures. Modification of the primary scheme of decontamination of explants was performed using the following basic chemicals: NaClO (10; 20; 30% and 3; 5; 7 minutes), AgNO3 (0.1; 0.2; 0.3 % and 5; 10; 15 minutes) and HgCl2 (1; 2; 3% and 5; 10; 15 minutes). To prevent the development of internal infections, 0.1% antibiotic «Imanin» was used. A study was conducted of the specific individual effect of the main chemical sterilants on the sterilization efficiency and viability of Pinus sylvestris L. explants. The optimal stepwise decontamination scheme for explants of the studied species was experimentally established, which provided sterilization efficiency of 94.33±1.41% and explant viability of 91.7±1.34% and consisted of alternate treatment of plant material as follows: С2Н5ОН (96%; 10 seconds) + Н2О with detergent (6 h) + Н2О2 (3%; 10 minutes) + С2Н5ОН (70 %; 10 s) + AgNO3 (0.2%; 5 minutes) + NaClO (30%; 5 minutes).

Перегляд елементу

Завантажень